Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.
Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.
ИФА анализ — это такоелабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.
Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.
ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.
Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.
Виды иммуноглобулинов
Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.
Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.
Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:
| Кол-во в организме | Функции | Период полураспада (дней) | Значение | |||||||||||||||||||||||||||
| G | 70% | Формируют пассивный иммунитет у новорожденного; необходимы для иммунного ответа улучшают фагоцитоз, | 21-24 | обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях | ||||||||||||||||||||||||||
| М | 5-10% | нужны для активации фагоцитоза, способны связать 5 молекул антигена, | 5 | Обеспечивает первичную иммунную реакцию | ||||||||||||||||||||||||||
| А | 10-15 | Нейтрализуют токсины и вирусы нужны для формирования раннего иммунитета Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A. Показания к сдаче анализа на иммуноглобулиныИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным. Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:
ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований. Подготовка к сдаче анализаПри подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил: Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок. Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается. Порядок взятия пробыВ качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови. Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.
Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала. Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С. Как делают анализПосле подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены. Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:
В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора. Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА. При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей. Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.
При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию. Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете. Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами. Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате. Когда будет готов анализПроведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий. Результаты теста и их расшифровкаНа полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител. Возможны различные интерпретации результатов:
Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:
Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:
ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом. Значение результатов тестаИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных. Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:
В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование. Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев). В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).
ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы. IgG- хроническая стадия инвазии |
||||||||||||||||||||||||||||
| IgA – заражение произошло более 30 дней назад | ||||||||||||||||||||||||||||||
| IgG – инвазия находится в острой фазе | ||||||||||||||||||||||||||||||
| IgG – подтверждает диагноз и показывает эффективность терапии |
Плюсы и минусы анализа
ИФА имеет множество достоинств, что и объясняет его популярность среди врачей и пациентов, это:
- высокая точность результата,
- доступная цена,
- быстрый результат,
- выявление стадии заболевания,
- контроль заболевания в динамике.
Однако наравне с достоинствами существует и недостаток – в редких случаях анализ бывает ложноположительным или ложноотрицательным.
Почему результат может быть недостоверным
Ошибки в результате могут возникать из-за технических нарушений, так же недостоверным анализ бывает у людей с некоторыми хроническими заболеваниями (ревматоидный фактор) для которых характерной является выработка специфических антител.
Так же на конечный результат оказывает влияние употребление пациентов медикаментов и нарушение метаболизма. По данным причинам положительный результат на ВИЧ и онкопатологии требует повторную сдачу проб.
Стоимость исследования
Цена ИФА варьируется в зависимости от направления диагностики (руб.):
- гепатит 250 -900;
- вирусы – 250 -1000;
- ВИЧ – 250-350;
- глистные инвазии – 280 — 900;
- сифилис -150-250;
- грибковые инфекции 400-500.
Оформление статьи: Лозинский Олег
Видео о ИФА анализе
Как выполняется анализ ИФА:
Особое внимание в настоящее время уделяется диагностированию ВИЧ (вируса иммунодефицита) у человека. Обнаружение болезни на ранней стадии поможет раньше начать лечебный курс и это существенно скажется на увеличении срока жизни больного.
После того, как будет сдан анализ на ВИЧ расшифровка результатов, как правило, бывает положительной, или отрицательной. При этом существует первичная диагностика и вторичная. При первичной - человека проверяют с помощью ИФА. Если это необходимо, делается повторный анализ крови на ВИЧ. Что значит положительный и отрицательный результат? Как делается расшифровка анализа на ВИЧ? Почему у человека, который не является наркоманом и алкоголиком, имеет постоянного полового партнера, расшифровка анализа на вирус иммунодефицита дает положительный, но сомнительный результат?
О ВИЧ
Возбудители заболевания бывают 1-ого и 2-ого типа. Продолжительный промежуток времени их присутствие у человека проходит незамеченным, дальше поражается в первую очередь иммунитет, затем другие системы человека.
При основном методе лабораторного диагностирования вируса иммунодефицита выявляются антитела к ВИЧ. Иммуноферментный анализ (ИФА) лежит в основе метода, он чувствителен (99,5% и выше) и специфичен (99,8% и выше). Кроме этого, при диагностировании ВИЧ с помощью ИФА определяют антиген р24.
Каждая тест-система имеет различные показатели, в связи с этим ими происходит определение различных белковых структур вирусных оболочек. Возбудители ВИЧ бывают двух подтипов: 1-ого и 2-ого или ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Вирусные частицы выглядят как сферическая форма, имеющая наружную фосфолипидную оболочку. Для 1-ого подтипа она имеет следующую молекулярную массу: gp120, gp41, gp160. 2-ой подтип содержит gp105, gp36, gp140. Для внутренней оболочки вируса молекулярная масса так же известна. Для 1-ого подтипа это - p55, p17, p24. Для 2-ого - p16, p25, p55.
Для каждой тест-системы, чтобы определить вирус, существует три основных набора белков.
Вообще результат ИФА может быть:
- отрицательный;
- ложноположительный;
- ложноотрицательный;
- сомнительный или неопределенный.
Методами диагностирования выявляются антигены, антитела.
О нормальном результате
Норма - что это значит? Когда анализ на ВИЧ отрицательный, это считается нормой.
1. Последнее поколение тест-систем ИФА позволяют определить наличие антител к ВИЧ и белковых частиц. Если анализ в норме, то в крови не находят антител и белковых частиц возбудителя. Но точно сказать, что человек здоров на основе этого можно, если до сдачи его отсутствовал риск заражения 3 месяца. В противном случае еще раз через какое-то время надо повторить сдачу анализов.
Бывали случаи, что ВИЧ обнаруживали только через 6 месяцев. Поэтому, если результат отрицателен, а был контакт с ВИЧ-инфицированным больным, для достоверности надо повторить сдачу анализов через три, четыре и шесть месяцев. Бывает, что ИФА дал отрицательный результат, а у человека явно есть подозрение на присутствие признаков ВИЧ, то рекомендуется сдать анализ еще раз. Ошибочный результат возможен из-за ранних сроков проведения анализа либо из-за человеческого фактора.
2. Если результат отрицательный получен при иммуноблоте, то в настоящее время это самый достоверный анализ.
Если у человека присутствует вирус иммунодефицита, а результат отрицательный, то скорее всего это врачебная ошибка, которая может возникнуть на любом этапе проверки. Если при повторе иммуноблота через три и шесть месяцев результат отрицательный, то беспокоиться не о чем, это говорит о норме. И только после отрицательного ответа иммуноблота будет выдана справка, что ВИЧ анализ отрицательный.
3. ПЦР исследование у взрослых при диагностировании вируса иммунодефицита используется крайне редко, а для только что рожденных детей используется именно этот метод.
Нормой здесь так же считается отрицательный результат.
4. Согласно социологическим исследованиям, многие пользуются экспресс-тестом на ВИЧ. При виде отрицательной полоски люди успокаиваются и отказываются идти в медицинское учреждение, даже при наличии всех признаков ВИЧ-инфицирования. Но надо знать, что точность экспресс-теста составляет восемьдесят пять процентов. Кроме этого, в домашних условиях можно неверно его провести, или будут нарушены условия его хранения. Возникает еще большая вероятность, что результат неверен. Даже прием за 8 часов до тестирования минеральной щелочной воды повлияет на результат теста. Поэтому о том, что вирус иммунодефицита отсутствует у человека на основании экспресс-теста, даже если он отрицательный, далеко не всегда является верным утверждением.
Расшифровка анализа
После того, как было проведено тестирование у людей часто возникает вопрос, как расшифровать результат исследований, что делать, если получен положительный результат на ВИЧ.
1. Если ИФА показал наличие всех или почти всех антител к антигенам согласно данной тест-системы, это обозначает положительный анализ на ВИЧ. Если ответ после проведения второго серологического иммуноферментного анализа положительный, то необходимо провести иммуноблот. Расшифровка результатов его будет более верной. Если иммуноферментный анализ дал положительный результат, следующий анализ иммуноблота так же показал наличие ВИЧ, то ставится заключительный результат. Когда расшифровываются анализы, то надо знать, что положительный тест на ВИЧ определяется:
- от 60% до 65% через 28 дней после заражения;
- в 80% - через 42 дня;
- в 90% - через 56 дней;
- в 95% - через 84 дня.
Если получен ответ на ВИЧ положительный, то это будет означать, что выявлены антитела к вирусу. Чтобы избежать ложноположительный ответ, надо сдать повторно анализы, желательно два раза. Если антитела к иммунодефициту выявлены при сдаче двух анализов из двух либо при сдаче 3-х анализов в 2-х из них, то считается, что результат положительный.
Антиген р 24 можно выявить в крови уже через 14 дней со дня заражения. С помощью метода иммуноферментного анализа этот антиген выявляется от 14 до 56 дней. По прошествии 60 дней его в крови уже нет. Только когда в организме формируется СПИД, происходит повторно рост этого белка р24 в крови. Поэтому тест-системы иммуноферментного анализа используются, чтобы обнаружить ВИЧ в первые дни заражения либо для того, чтобы определить, как протекает заболевание и контролировать процесс лечения. Высокая аналитическая чувствительность иммуноферментного анализа обнаруживает антиген р24 в биологическом материале при ВИЧ первого подтипа в концентрации от 5 до 10 пкг/мл, при ВИЧ второго подтипа от 0,5 нг/мл и меньше.
2. Под сомнительным результатом иммуноферментного анализа подразумевается, что при диагностировании где-то ошиблись, как правило, что-то перепутали медицинские работники, или у человека есть признаки инфицирования, а результат отрицательный, что вызывает подозрение, человека направляют на повторную сдачу анализа.
3. Под ложноположительным результатом понимается результат, когда сдача анализов крови была сделана при следующих состояниях больного:
- беременность;
- если у человека нарушен гормональный фон;
- при продолжительной иммунодепрессии.
Как расшифровать анализ в этом случае? Ложноположительный результат ставится, если выявляется хотя бы один белок.
Из-за того, что антиген р24 очень зависит от индивидуальных вариаций, то, используя этот метод, в первый период заражения выявляется от 20% до 30% больных.
О показателях после исследования методом полимеразной цепной реакции
Используя этот метод РНК ВИЧ и ДНК обнаруживается почти сразу после заражения. Но окончательного диагноза не ставится, требуется обязательное подтверждение другими методами. «Помогите расшифровать результат ПЦР.» - довольно часто можно услышать такую просьбу. Что пишется в этом случае, если обнаруживается вирус иммунодефицита? При ответе на результат анализа, сделанного с помощью ПЦР указывается количество копий РНК в миллилитре крови. В таблице, приведенной ниже, показан результат в зависимости от количественных характеристик в крови.
Использовать вышеприведенную таблицу хорошо, когда делается обследование на СПИД, так как по ней легко определяется стадия болезни.
Эти таблицы с учетом различных тест-систем есть в лабораторных кабинетах для каждого метода иммуноферментного анализа и иммуноблоттинга.
Часто просят: «Расшифруйте ответ после исследования методом полимеразной цепной реакции по показателю СД4.» Нормальным считается количество клеток СД4 от 600 до 1900 клеток на миллилитр биологического материала. Это соответствует ВИЧ-отрицательному статусу. Но надо знать, что эти показатели даже у здоровых людей бывают не в этом диапазоне.
В современном мире уже много лабораторий имеют хорошее оборудование, с помощью которого можно полностью исследовать организм на содержание в нем ВИЧ-инфекции.
Вконтакте
Своевременная диагностика ВИЧ-инфекции становится крайне важной мерой, т. к. ранее начало лечения может во многом предопределить дальнейшее развитие заболевания и продлить жизнь больного . В последние годы наблюдается весомый прогресс в области выявления этой страшной болезни: на смену старым тест-системам приходят более совершенные, методы обследования становятся более доступными, и их точность значительно повышается.
В данной статье расскажем о современных методах диагностики ВИЧ-инфекции, знать которые полезно для своевременного лечения данной проблемы и поддержания нормального качества жизни заболевшего.
Методики диагностики ВИЧ
В России для диагностики ВИЧ-инфекции проводится стандартная процедура, включающая в себя два уровня:
- ИФА тест- система (скрининговый анализ);
- иммунный блоттинг (ИБ).
Также для диагностики могут применяться другие методики:
- экспресс-тесты.
ИФА тест-системы
На первом этапе диагностики для выявления ВИЧ-инфекции применяется скрининговый тест (ИФА), который основан на созданных в лабораториях белках ВИЧ, улавливающих вырабатывающиеся в организме в ответ на инфицирование специфические антитела. После их взаимодействия с реагентами (ферментами) тест-системы изменяется окраска индикатора. Далее эти изменения цвета обрабатываются на специальной аппаратуре, которая и определяет результат выполненного анализа.
Такие ИФА-тесты способны показывать результат уже через несколько недель после внедрения ВИЧ-инфекции. Этот анализ определяет не наличие вируса, а выявляет выработку антител к нему. Иногда, в организме человека выработка антител к ВИЧ начинается через 2 недели поле заражения, но у большинства людей они вырабатываются на более поздних сроках, спустя 3-6 недель.
Существует четыре поколения ИФА-тестов с различной чувствительностью. В последние годы чаще применяются тест-системы III и IV поколения, которые созданы на основе синтетических пептидов или рекомбинантных белков и обладают большей специфичностью и точностью. Они могут использоваться для диагностики ВИЧ-инфекции, мониторинга распространенности ВИЧ и обеспечения безопасности при проверке донорской крови. Точность ИФА-тест-систем III и IV поколения составляет 93-99% (более чувствительны тесты, которые выпускаются в странах западной Европы – 99%).
Для выполнения ИФА-теста проводится забор 5 мл крови из вены пациента. Между последним приемом пищи и анализом должно пройти не менее 8 часов (как правило, он выполняется утром натощак). Такой тест рекомендуется сдавать не ранее, чем через 3 недели после предполагаемого заражения (например, после незащищенного полового акта с новым половым партнером).
Результаты ИФА-теста получаются через 2-10 дней:
- отрицательный результат: указывает на отсутствие инфицирования ВИЧ и не требует обращения к специалисту;
- ложноотрицательный результат: может наблюдаться на ранних сроках инфицирования (до 3 недель), при поздних стадиях СПИДа при выраженном подавлении иммунитета и при неправильно проведенной подготовке крови;
- ложноположительный результат: может наблюдаться при некоторых заболеваниях и при неправильно проведенной подготовке крови;
- положительный результат: указывает на заражение ВИЧ инфекцией, требует проведения ИБ и обращения пациента к специалисту в центр СПИДа.
Почему ИФА-тест может давать ложноположительные результаты?
Ложноположительные результаты ИФА-теста на ВИЧ могут наблюдаться при неправильной обработке крови или у больных с такими состояниями и заболеваниями:
- множественная миелома;
- инфекционные заболевания, спровоцированные вирусом Эпштейна-Барр;
- состояние после ;
- аутоиммунные заболевания;
- на фоне беременности;
- состояние после вакцинации.
При вышеописанных причинах в крови могут присутствовать неспецифические перекрестно реагирующие антитела, выработка которых была спровоцирована не ВИЧ-инфекцией.
В последние годы частота ложноположительных результатов существенно снизилась благодаря применению тест-систем III и IV поколения, которые содержат более чувствительные пептидные и рекомбинантные белки (они синтезируются при помощи генной инженерии in vitro). После начала применения таких ИФА-тестов частота ложноположительных результатов значительно снизилась и составляет около 0,02-0,5%.
Выявление ложноположительного результата не означает, что человек инфицирован ВИЧ. В таких случаях ВОЗ рекомендует провести еще один ИФА-тест (обязательно IV поколения).
Кровь пациента отправляется в референс или арбитражную лабораторию с пометкой «повторить» и исследуется на ИФА тест-системе IV поколения. Если результат нового анализа отрицательный, то первый результат признается ошибочным (ложноположительным) и ИБ не проводится. При положительном или сомнительном результате во время второго теста больному обязательно назначается проведение ИБ через 4-6 недель для подтверждения или опровержения ВИЧ-инфицирования.
Иммунный блоттинг
Окончательный диагноз инфицирования ВИЧ может устанавливаться только после получения положительного результата иммунного блоттинга (ИБ). Для его проведения применяется нитроцеллюлозная полоска, на которую нанесены вирусные белки.
Забор крови для ИБ выполняется из вены. Далее она подвергается специальной обработке и содержащиеся в ее сыворотке белки разделяют в специальном геле по их заряду и молекулярной массе (манипуляция проводится на специальной аппаратуре под воздействием электрического поля). На гель из сыворотки крови накладывают нитроцеллюлозную полоску и проводят блоттинг («промакивание») в специальной камере. Полоска обрабатывается и если в используемых материалах есть антитела к ВИЧ, то они связываются с антигенными полосами на ИБ и проявляются в виде линий.
ИБ считается положительным если:
- по критериям American CDC – на полоске есть две или три линии gp41, p24, gp120/gp160;
- по критериям American FDA – на полоске есть две линии р24, р31 и линия gр41 или gр120/gр160.
В 99,9% случаев положительный результат ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование.
При отсутствии линий – ИБ является отрицательным.
При выявлении линий с gр160, gр120 и gр41- ИБ является сомнительным. Такой результат может выявляться при:
- онкологических заболеваниях;
- беременности;
- частых трансфузиях крови.
В таких случаях рекомендуется выполнение повторного исследования при помощи набора другой фирмы. Если же после дополнительного ИБ результат остается сомнительным, то необходимо наблюдение в течение полугода (через каждые 3 месяца проводятся ИБ).
Полимеразная цепная реакция
Тест на ПЦР может определять РНК вируса. Его чувствительность достаточно высока и он позволяет выявлять ВИЧ-инфицирование уже через 10 дней после заражения. В некоторых случаях ПЦР может давать ложноположительные результаты, т. к. его высокая чувствительность может реагировать и на антитела к другим инфекциям.
Данная методика диагностики является дорогостоящей, требует специального оборудования и высокой квалификации специалистов. Эти причины не дают возможности проводить ее при массовом тестировании населения.
ПЦР применяется в таких случаях:
- для выявления ВИЧ у новорожденных, которые родились от ВИЧ-инфицированных матерей;
- для выявления ВИЧ в «периоде окна» или при сомнительном ИБ;
- для контроля концентрации ВИЧ в крови;
- для исследования донорской крови.
Только по тесту ПЦР диагноз ВИЧ не ставится, а проводится в качестве дополнительного метода диагностики для разрешения спорных ситуаций.
Экспресс-методы
Одной из инноваций в диагностике ВИЧ стали экспресс-тесты, результаты которых могут оцениваться уже через 10-15 минут. Наиболее эффективные и точные результаты получаются при помощи иммунохроматографических тестах, основанных на принципе капиллярного потока. Они представляют собой специальные полоски, на которые наносится кровь или другие исследуемые жидкости (слюна, моча). При наличии антител к ВИЧ спустя 10-15 минут на тесте появляются цветная и контрольная полоска – положительный результат. При отрицательном результате – появляется только контрольная полоска.
Как и после тестов ИФА, результаты экспресс-тестов должны подтверждаться анализом ИБ. Только после этого может ставиться диагноз о ВИЧ-инфицировании.
Существуют экспресс-наборы для домашнего тестирования. Тест OraSure Technologies1 (США) одобрен FDA, продается без рецепта и может применяться для выявления ВИЧ. После проведения теста, в случае положительного результата, больному рекомендуется пройти обследование в специализированном центре для подтверждения диагноза.
Остальные тесты для домашнего использования еще не были одобрены FDA и их результат может быть очень сомнительным.
Несмотря на то, что экспресс-тесты по своей точности уступают ИФА-тестам IV поколения, они широко применяются для дополнительного тестирования населения.
Сдать анализы на выявление ВИЧ-инфекции можно в любой поликлинике, ЦРБ или в специализированных СПИД-центрах. На территории России они проводятся абсолютно конфиденциально, или анонимно. Каждый пациент может рассчитывать на получение медицинской или психологической консультации до или после проведения анализа. Платить за тесты на ВИЧ придется только в коммерческих лечебных учреждениях, а в государственных поликлиниках и больницах они выполняются бесплатно.
О том, какими путями можно заразиться ВИЧ-инфекцией и какие мифы существуют о возможностях заразиться, читайте в
ВИЧ – бич нашего поколения. Какие существуют методы для диагностики ВИЧ, углубленная информация о ИФА-тесте на ВИЧ. Как сдавать, как трактовать результаты анализа.
Вирус иммунодефицита человека – одна из самых страшных инфекций для нашего поколения.
ВИЧ деструктивно влияет на нашу иммунную систему, и если вовремя не остановить прогресс заболевания, он может трансформироваться в синдром приобретенного иммунодефицита . ВИЧ распространяется через непосредственный контакт партнеров при сексуальном акте через мужские и женские половые органы. Еще одной причиной заражения может стать попадание вируса через кровь. Это происходит вследствие использования нестерильных инструментов, переливанием зараженной крови и даже через поколения: ребенку от инфицированной матери при кормление грудью.
До сих пор ученые по всему миру ломают голову над созданием лекарства нового поколения, способного излечить от СПИДа, однако, несмотря на большие темпы научного прогресса, вирус иммунодефицита человека продолжает распространяться по планете.
ИФА – метод диагностики ВИЧ
Учеными поколения 20-го века разработано несколько методов диагностики ВИЧ, важнейшим из которых считают иммуноферментный анализ. ИФА на ВИЧ стали проводить относительно недавно – в начале девяностых годов. С течением времени метод оттачивался, приобретал новые детали. Теперь достоверность метода ИФА одна из самых высоких – около 98%. Соответственно, такой метод проводится все чаще.
ИФА – первый анализ, с которым сталкивается пациент при обследовании на ВИЧ. Метод ИФА определяет наличие в крови антител. Если тест находит присутствие антител в крови, значит, и вирус присутствует. Однако, информацию по этому тесту необходимо подкреплять и другими анализами, такими как иммунный блоттинг (ИБ) и метод последнего поколения – полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Антитела – специальные белковые соединения, которые продуцируют плазматические клетки после как реакцию на попадание в организм инфекции (антитела начинают образовываться через 1-2 месяца с момента заражения).
Причины возникновения ВИЧ
Врач выпишет вам направление на анализ, если вы контактировали с человеком, зараженным ВИЧ либо существует опасность инфицирования. К группе опасности заражения ВИЧ относят поколения людей:
- проходящих в течение месяца курс инъекционного лечения;
- имеющих сексуальные отношения без специальных средств предохранения;
- переносчиков инфекций, передающихся во время сексуального контакта;
- пациентам после прохождения процедуры переливания крови либо укола обнаружения причины свертывания крови в восьмидесятые годы.
Если у вас есть сомнения относительно вашего ВИЧ-статуса и опасения, связанные с возможностью заражения, рекомендуется незамедлительно обратиться за помощью в любое медицинское учреждение нашей страны для проведения комплексного обследования на ВИЧ. Результат на анализы получают в течение месяца. Людям в группе риска по ВИЧ рекомендуется проходить обследование через каждые 4 месяца.
Как сдать анализ
Какой-то особенной подготовки к сдаче анализа крови на ВИЧ не требуется, однако лучше придерживаться простейших правил:
- лучше не кушать с вечера, а сдавать анализ натощак утром;
- не советуют загружать организм физической работой;
- употреблять здоровую пищу, воздержаться на некоторое время от сигарет и алкоголя;
- для исключения ложных показателей теста не стоит сдавать анализ после лечения серьезных заболеваний.
